木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（LiP）測(cè)試盒

微量法100T/96S

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（EC1.11.1.14）是一種含亞鐵血紅素的過(guò)氧化物酶，屬于木質(zhì)素降解酶系，在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力。

測(cè)定原理

木質(zhì)素過(guò)氧化物酶催化天青脫甲基，在651nm處測(cè)定吸光值減少。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、可調(diào)式移液器、冰。

試劑組成和配制    

試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入115mL蒸餾水，充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存一個(gè)月。

試劑二：液體5mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體5mL×1支，4℃保存。

酶液提取

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 培養(yǎng)液或其它液體：直接檢測(cè)。                         

測(cè)定操作

1、酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至651nm。

2、臨用前按每個(gè)樣本試劑一：試劑二：試劑三=80:40:40（μL）的比例配制工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

3、在96孔板中依次加入如下試劑

酶活計(jì)算公式

1．按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義：每mg組織蛋白在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.01為一個(gè)酶活力單位。

LiP活性（U/mg prot）= ΔA×V反總÷（V樣×Cpr）÷0.01÷T =250×ΔA÷Cpr

2．按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義：每g組織在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.01為一個(gè)酶活力單位。

LiP活性（U/g 鮮重）=ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.01÷T =250×ΔA÷W

3．按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活性定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.01為一個(gè)酶活力單位。

LiP活性（U/104 cell）=ΔA×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷0.01÷T=0.5×ΔA

4．按照液體體積計(jì)算

酶活性定義：每mL血清（漿）在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A651變化0.01為一個(gè)酶活力單位。

LiP活性（U/mL）=ΔA×V反總÷V樣÷0.01÷T =250×ΔA

V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，2min

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國(guó)內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

2. 國(guó)外試劑的訂購(gòu)?？商峁W美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購(gòu)方案。

3. 提供加急物流處理，進(jìn)口貨物，最快交期1-2周。

4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質(zhì)量保證，所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式，為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開(kāi)發(fā)需求。公司整合國(guó)際與國(guó)內(nèi)資源，加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè)，提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率，為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

7. 公司突出創(chuàng)新思維，提高工作效能，減低運(yùn)作成本，為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（LiP）測(cè)試盒