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關(guān)于細胞分離試劑盒

更新時間:2023-12-22      點擊次數(shù):2150

過研究體內(nèi)組織來源的細胞,可以對細胞的生物學(xué)和功能進行有效的預(yù)測,但這需要對靶標(biāo)細胞群體進行分離,否則生物學(xué)的復(fù)雜性可能導(dǎo)致結(jié)果混淆。為了對細胞表型進行研究,目前已開發(fā)出多種基于明確特征對細胞群體進行分離的不同方法。對細胞群體進行分離不僅有助于生物學(xué)研究,而且也能促進臨床上的診斷性檢測。有效的分離方法應(yīng)具備出色的產(chǎn)量、純度和活力??赏ㄟ^正向選擇(通常采用結(jié)合細胞特異性標(biāo)志物的抗體)或負向選擇(基于生物物理特性將不需要的細胞進行去除從而富集靶標(biāo)細胞群體)來實現(xiàn)對靶標(biāo)細胞群體的富集或純化。

長期以來,將細胞分離成各種亞細胞成分一直都是細胞生物學(xué)研究的基礎(chǔ)。亞細胞分離技術(shù)已廣泛用于研究細胞器和亞細胞區(qū)室的結(jié)構(gòu)和功能,以及了解生物分子的定位、加工和運輸。大多數(shù)分離技術(shù)都旨在獲得處于功能性狀態(tài)的細胞器和細胞大分子,此時它們?nèi)员A羝涔逃械纳匦?。這通常通過采用溫和的機械方法或使用溫和的去污劑進行細胞裂解,然后通過差異離心將細胞成分進行分離來實現(xiàn)。

基于表型的細胞分離

為了評估脂質(zhì)裂解、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、內(nèi)分泌功能和代謝活性,可以使用前脂肪細胞來研究脂肪形成和分化后的過程。

我們的前脂肪細胞分離試劑盒包含了從脂肪組織中分離基質(zhì)血管細胞成分所需的工具和試劑。所得到的基質(zhì)血管成分將會培養(yǎng)在前脂肪細胞所粘附的組織培養(yǎng)板上。前脂肪細胞保留了增殖以及在使用誘導(dǎo)分化成分處理時可分化為脂肪細胞的能力。

細胞器和亞細胞復(fù)合物的分離

亞細胞成分的衍生可促進對細胞器功能的理解,并催生新的生物技術(shù)。例如,從哺乳動物細胞中分離出的細胞核可后續(xù)用于合成內(nèi)源性RNA初級轉(zhuǎn)錄本。我們已開發(fā)出了高產(chǎn)量的Nuclei EZ Prep試劑盒,可快速分離出大多數(shù)哺乳動物的細胞核。

為了檢測線粒體的完整性和膜電位,我們的線粒體染色試劑盒使用了JC-1染料,其會集中在線粒體基質(zhì)中并形成紅色熒光團。細胞凋亡等能夠消耗線粒體膜電位的事件會阻止JC-1染料在線粒體中的積累,因此可利用熒光顯微鏡來區(qū)分具有活力的線粒體和受損的線粒體。

另外,也可分離非細胞器的亞細胞復(fù)合物(如蛋白酶體),將其用于蛋白水解測定。我們使用含有一段GST融合蛋白的親和基質(zhì)微珠進行分離,該融合蛋白具有可與GST-瓊脂糖結(jié)合的泛素樣結(jié)構(gòu)域。

細胞骨架富集

傳統(tǒng)上,研究與肌動蛋白細胞骨架相關(guān)的蛋白都很棘手,因為細胞骨架元素不溶于類似于Triton X-100的去污劑。Millipore ProteoExtract細胞骨架富集和分離試劑盒帶有細胞骨架純化緩沖液,能夠保留粘著斑和肌動蛋白相關(guān)蛋白并同時從細胞中去除可溶性細胞質(zhì)和核蛋白。該方法可增強檢測并研究低豐度肌動蛋白相關(guān)蛋白的能力,而這些蛋白在使用Western blotting分析全細胞裂解物時通常會被掩蓋掉。



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