除嗜堿性粒細(xì)胞外，多形核白細(xì)胞(PMN)的漂浮密度比單核細(xì)胞大得多，大于1.085 g/ml。不幸的是，紅細(xì)胞的漂浮密度往往為1.09 - 1.11 g/ml，這使得使用類似于單核細(xì)胞的密度屏障從全血中分離更加困難。為了克服這些困難，已經(jīng)開發(fā)了許多程序。

多晶型制劑的高滲透壓銩導(dǎo)致紅細(xì)胞失水和收縮，從而增加其有效浮力密度。這使得葡聚糖聚集的紅細(xì)胞通過致密介質(zhì)快速沉淀。

因為隨著細(xì)胞進一步沉淀到介質(zhì)中，介質(zhì)和紅細(xì)胞之間的滲透梯度下降(即紅細(xì)胞的失水在多晶型物的頂部最大并且隨著它們進一步沉淀而逐漸減少)，在密度屏障內(nèi)形成泛影葡胺的梯度。PMNs在該密度梯度內(nèi)形成條帶，而單核細(xì)胞留在樣品/培養(yǎng)基界面。

使用特定的LAL試驗檢查每批多晶型制劑的內(nèi)毒素水平。我們的目標(biāo)是生產(chǎn)內(nèi)毒素水平低于或等于0.13 IU/ml的批次。

該方法僅對未稀釋的全血有效，對富含白細(xì)胞的部分無效。溫度對于獲得最佳結(jié)果非常重要，因為溫度的變化會影響多晶型物的密度和粘度解決方案。血樣和培養(yǎng)基的溫度應(yīng)保持在18-22攝氏度之間。

多晶型制備物頂部和底部條帶的分析銩可以通過Coulter STKR細(xì)胞分析儀進行分離。分析儀將樣品中的細(xì)胞數(shù)量(縱坐標(biāo))確定為細(xì)胞體積(橫坐標(biāo))的函數(shù)。相對細(xì)胞數(shù)是特定體積的細(xì)胞數(shù)，表示為每個樣品中總細(xì)胞數(shù)的一部分。

多形制劑頂部的細(xì)胞帶僅包含外周血單核細(xì)胞(PBMCs)。細(xì)胞帶本身可分為淋巴細(xì)胞(上層，1)和單核細(xì)胞(下層，2)。所有PMN都在底部單元帶中，被多晶型制備溶液包圍。紅細(xì)胞對PMN帶的污染占細(xì)胞總數(shù)的2-6 %