（L-丙氨酸:2氧代戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶；2.6.1.2谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）也稱(chēng)為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。它催化以下反應(yīng):GPT L-丙氨酸+α-酮戊二酸-》丙酮酸+L-谷氨酸轉(zhuǎn)氨反應(yīng)在中間代謝中起重要作用。轉(zhuǎn)氨酶的催化活性需要磷酸吡哆醛作為輔酶。GPT存在于許多動(dòng)植物組織中，在哺乳動(dòng)物的心臟和肝臟中活性尤其高。這種酶在哺乳動(dòng)物組織中以?xún)煞N不同的同工酶形式存在，線(xiàn)粒體形式和細(xì)胞質(zhì)形式。來(lái)自豬心的GPT已被廣泛研究。它的分子量為10萬(wàn)。

在pH 7.5和25℃的磷酸鉀緩沖液中，催化1微摩爾α-酮戊二酸轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-谷氨酸的酶量

由NADH氧化引起的340 nm處吸光度的降低與GPT的催化活性成正比。

組分：

0.1 M磷酸鉀緩沖液，pH 7.5。

緩沖液中的1.15M L-丙氨酸（103毫克/毫升）。

緩沖液中的0.31Mα-酮戊二酸（45毫克/毫升）。

蒸餾水中的0.008 M NADH二鈉鹽（5毫克/毫升）。準(zhǔn)備新鮮的。

乳酸脫氫酶（LDH），緩沖液中250 U/ml?；?yàn)前立即準(zhǔn)備新鮮樣品。

酶（GPT）溶液。在緩沖液中制備，使最終濃度為0.1-0.2 U/ml。必須在化驗(yàn)前立即制備新鮮樣品。

PROCEDURE

1. 將分光光度計(jì)（配有條形記錄儀和溫度控制裝置）設(shè)置在340 nm和25°c。

2.向比色皿移液管中加入所示量的以下試劑: 左旋丙氨酸2.60毫升 α-酮戊二酸鹽0.10毫升 NADH 0.10毫升 乳酸脫氫酶0.10毫升 混合并在分光光度計(jì)中孵育5分鐘以達(dá)到溫度平衡，然后記錄340 nm處的空白率。

3.通過(guò)向比色皿中加入0.1毫升酶（GPT）溶液來(lái)啟動(dòng)反應(yīng)。

4.記錄5-8分鐘內(nèi)340 nm處吸光度的下降率。

5.計(jì)算(delta)E340nm納米/分鐘