Magnetofection™ 是一種簡(jiǎn)單且高效的方法轉(zhuǎn)染方法可轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞和難轉(zhuǎn)染細(xì)胞。

Magnetofection™ 的原理是將核酸、轉(zhuǎn)染試劑或病毒與特定的磁性納米粒子結(jié)合起來(lái)。然后將所得的分子復(fù)合物濃縮并運(yùn)輸?shù)接蛇m當(dāng)磁場(chǎng)支持的細(xì)胞中。通過(guò)這種方式，利用施加在基因載體上的磁力可以將所施加的全部載體劑量非?？焖俚丶性诩?xì)胞上，從而使 100% 的細(xì)胞與有效的載體劑量接觸，并促進(jìn)細(xì)胞攝取。

它是如何工作的？

磁性納米顆粒由氧化鐵制成，可生物降解，并根據(jù)應(yīng)用涂有特定的專(zhuān)有陽(yáng)離子分子。它們與基因載體（DNA、siRNA、ODN、病毒等）的結(jié)合是通過(guò)鹽誘導(dǎo)的膠體聚集和靜電相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的。然后，通過(guò)特定磁板產(chǎn)生的外部磁場(chǎng)的影響，磁性顆粒被濃縮到細(xì)胞上。遺傳物質(zhì)的細(xì)胞攝取是通過(guò)胞吞作用和胞飲作用這兩個(gè)自然生物過(guò)程來(lái)完成的。因此，與破壞細(xì)胞膜、產(chǎn)生孔洞或電擊細(xì)胞膜的其他物理轉(zhuǎn)染方法相比，膜結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)保持完整。然后，根據(jù)所使用的制劑，通過(guò)不同的機(jī)制將核酸釋放到細(xì)胞質(zhì)中。

1. 首先是納米顆粒上包覆的陽(yáng)離子聚合物引起的質(zhì)子海綿效應(yīng)，促進(jìn)內(nèi)體滲透膨脹、內(nèi)體膜破壞和細(xì)胞內(nèi) DNA 釋放。

2. 其次是顆粒上包被的陽(yáng)離子脂質(zhì)使內(nèi)體不穩(wěn)定，通過(guò)細(xì)胞負(fù)性脂質(zhì)的翻轉(zhuǎn)和電荷中和將核酸釋放到細(xì)胞中。

3. 第三個(gè)是使用病毒時(shí)通常的病毒機(jī)制。

磁性納米顆粒的生物分布

可生物降解的陽(yáng)離子磁性納米粒子在推薦劑量甚至更高劑量下沒(méi)有毒性。基因載體/磁性納米顆粒復(fù)合物在 10-15 分鐘后內(nèi)化到細(xì)胞中，即比任何其他轉(zhuǎn)染方法快得多。 24、48 或 72 小時(shí)后，大多數(shù)顆粒位于細(xì)胞質(zhì)、液泡（細(xì)胞周?chē)Y(jié)構(gòu)的膜）中，偶爾位于細(xì)胞核中。此外，磁性納米粒子不影響細(xì)胞功能。

有哪些應(yīng)用？

Magnetofection™ 是適用于所有類(lèi)型核酸（DNA、siRNA、dsRNA、shRNA、mRNA、ODN...）、非病毒轉(zhuǎn)染系統(tǒng)（轉(zhuǎn)染試劑）和病毒的通用技術(shù)。

如何使用 Magnetofection™ 試劑？

該方案是一個(gè)非常簡(jiǎn)單的程序：
1. 在無(wú)血清培養(yǎng)基或緩沖液中稀釋核酸或載體，并添加 Magnetofection™ 試劑。
2. 孵育 20-30 分鐘。
3. 將這些復(fù)合物直接添加到細(xì)胞中。
4.施加磁場(chǎng)（將培養(yǎng)板放在磁力板上）。
5. 孵育5-20分鐘，取出磁板并培養(yǎng)細(xì)胞直至測(cè)定。

需要特定的設(shè)備嗎？

Magnetofection™ 要求是磁板專(zhuān)為此應(yīng)用而設(shè)計(jì)。磁性板是一次性購(gòu)買(mǎi)且可重復(fù)使用，因此您不需要與電穿孔或基因槍等方法相反的昂貴設(shè)備?；旧希璧拇艌?chǎng)是由特定的磁鐵產(chǎn)生的。三種磁性板可供選擇：超級(jí)磁性板、具有 96 個(gè)磁鐵的磁性板和巨型磁性板。他們的設(shè)計(jì)允許產(chǎn)生異質(zhì)磁場(chǎng)，磁化溶液中的納米顆粒，形成非常強(qiáng)的梯度以吸引納米顆粒并覆蓋板的所有表面。該板可用 70% 乙醇清洗并在培養(yǎng)箱或機(jī)器人中使用。